人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體試劑盒用于定量檢測(cè)血清等樣本中PDI濃度。采用雙抗體夾心法，靈敏度高。主要用于蛋白質(zhì)折疊、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的科研分析。

人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體試劑盒

人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）原理，以特異性抗人PDI前體單克隆抗體為包被抗體，包被于酶標(biāo)板微孔內(nèi)，可特異性捕獲樣本中的人PDI前體；再加入檢測(cè)抗體（酶標(biāo)二抗），與捕獲的PDI前體形成“包被抗體-PDI前體-酶標(biāo)二抗"復(fù)合物；最后加入底物液，酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色強(qiáng)度與樣本中PDI前體的含量呈正相關(guān)，通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度（OD值），結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量計(jì)算樣本中PDI前體的濃度。試劑盒包含酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等全套預(yù)配試劑，無(wú)需額外配制核心試劑，全程遵循ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作流程，操作步驟簡(jiǎn)潔，檢測(cè)周期短（全程約2.5-3小時(shí)），降低實(shí)驗(yàn)操作難度。該試劑盒經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)量檢測(cè)，批內(nèi)變異系數(shù)（CV）＜8%，批間變異系數(shù)（CV）＜10%，靈敏度可達(dá)0.05ng/mL，特異性強(qiáng)，不與成熟PDI、其他內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白、無(wú)關(guān)蛋白及多肽發(fā)生交叉反應(yīng)，可精準(zhǔn)識(shí)別PDI前體，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠；試劑穩(wěn)定性高，經(jīng)梯度溫度驗(yàn)證，可在規(guī)定儲(chǔ)存條件下穩(wěn)定保存，確保檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性與一致性，適配各類(lèi)PDI前體相關(guān)定量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，為科研實(shí)驗(yàn)提供精準(zhǔn)的數(shù)據(jù)支撐，同時(shí)契合PDI前體臨床科研檢測(cè)的核心需求。

試劑盒核心特性

該試劑盒既具備ELISA檢測(cè)試劑盒的固有優(yōu)勢(shì)，又針對(duì)人PDI前體檢測(cè)需求（重點(diǎn)適配未成熟蛋白檢測(cè)、區(qū)分PDI前體與成熟PDI及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白）進(jìn)行專(zhuān)項(xiàng)優(yōu)化，核心特性突出，適配分子生物學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)等科研及相關(guān)檢測(cè)場(chǎng)景需求：一是特異性強(qiáng)，采用高特異性抗人PDI前體單克隆抗體，可精準(zhǔn)識(shí)別樣本中的人PDI前體，交叉反應(yīng)率＜5%，不與成熟PDI、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白及無(wú)關(guān)蛋白發(fā)生反應(yīng)，有效避免成熟PDI及雜蛋白干擾，確保檢測(cè)結(jié)果的特異性與準(zhǔn)確性，契合PDI前體作為未成熟蛋白的檢測(cè)需求；二是靈敏度高，檢測(cè)下限低至0.05ng/mL，可精準(zhǔn)檢測(cè)樣本中低濃度PDI前體，能夠捕捉到樣本中PDI前體的微小含量變化，適配不同濃度梯度樣本的檢測(cè)，滿足內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、腫瘤發(fā)生等研究中PDI前體異常表達(dá)的檢測(cè)需求，同時(shí)可準(zhǔn)確檢測(cè)細(xì)胞分化、疾病進(jìn)展及藥物干預(yù)過(guò)程中PDI前體的含量波動(dòng)；三是操作便捷，試劑盒提供全套預(yù)配試劑，酶標(biāo)板已預(yù)先包被抗體，無(wú)需額外進(jìn)行包被、封閉等復(fù)雜操作，實(shí)驗(yàn)步驟清晰，無(wú)需專(zhuān)業(yè)檢測(cè)技能，普通實(shí)驗(yàn)室即可完成檢測(cè)，降低實(shí)驗(yàn)門(mén)檻；四是重復(fù)性好，批內(nèi)、批間變異系數(shù)均控制在合理范圍內(nèi)，不同批次試劑盒檢測(cè)結(jié)果一致性高，同一樣本多次檢測(cè)偏差小，保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可重復(fù)性，符合科研實(shí)驗(yàn)對(duì)檢測(cè)穩(wěn)定性的核心要求；五是檢測(cè)范圍廣，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為0.05ng/mL-40ng/mL，可覆蓋多數(shù)科研樣本中PDI前體的含量范圍，適配血清、血漿、細(xì)胞裂解液、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等多種樣本類(lèi)型，兼容性強(qiáng)，同時(shí)適配不同預(yù)處理方式的樣本檢測(cè)；六是質(zhì)量可控，每批試劑盒均提供完整的質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告，包含靈敏度、特異性、重復(fù)性、穩(wěn)定性等檢測(cè)指標(biāo)，同時(shí)附帶標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)圖譜及成熟PDI、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白交叉反應(yīng)驗(yàn)證數(shù)據(jù)，方便實(shí)驗(yàn)人員驗(yàn)證產(chǎn)品性能，適配實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建檔保存需求。

檢測(cè)操作方法

該試劑盒基于ELISA雙抗體夾心原理，操作需遵循酶聯(lián)免疫檢測(cè)常規(guī)規(guī)范，重點(diǎn)兼顧試劑平衡、孵育溫度及洗滌操作，避免影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，結(jié)合PDI前體樣本檢測(cè)特點(diǎn)（作為未成熟蛋白，易受蛋白酶降解，主要定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，樣本需充分裂解釋放），具體操作方法如下：一是實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備，將試劑盒所有試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20-25℃）平衡30分鐘，避免溫度驟變影響試劑活性及PDI前體檢測(cè)準(zhǔn)確性；準(zhǔn)備好樣本、酶標(biāo)儀、移液器、離心管等實(shí)驗(yàn)器材，實(shí)驗(yàn)所用器材需提前滅菌處理，確保無(wú)酶、無(wú)熱源、無(wú)污染；樣本需按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行預(yù)處理（血清/血漿樣本2000-3000r/min離心20分鐘收集上清，避免溶血；組織勻漿、細(xì)胞裂解液樣本冰浴裂解后，加入蛋白酶抑制劑防止PDI前體降解，離心去除沉淀；保存過(guò)程中置于4℃或冰浴，避免PDI前體變性、降解），預(yù)處理后的樣本置于4℃暫存，避免反復(fù)凍融，同時(shí)嚴(yán)禁檢測(cè)含NaN3的樣本，因NaN3會(huì)抑制辣根過(guò)氧化物酶（HRP）活性；二是加樣反應(yīng)，將標(biāo)準(zhǔn)品、空白對(duì)照、樣本分別加入酶標(biāo)板微孔中，每孔加入50μL，每組設(shè)置3個(gè)復(fù)孔，確保加樣量精準(zhǔn)，避免氣泡產(chǎn)生；加入50μL酶標(biāo)二抗，輕輕振蕩酶標(biāo)板，使試劑與樣本充分混合，封板后置于37℃孵育60分鐘，孵育過(guò)程中避免酶標(biāo)板晃動(dòng)，確保孵育溫度均勻；三是洗滌步驟，孵育結(jié)束后，棄去孔內(nèi)液體，加入洗滌液，每孔300μL，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，zui后一次洗滌后，將酶標(biāo)板倒置在吸水紙上拍干，避免孔內(nèi)殘留洗滌液，防止影響顯色反應(yīng)；四是顯色與終止，每孔加入50μL底物液，輕輕振蕩混勻，封板后置于37℃避光孵育15-20分鐘，直至標(biāo)準(zhǔn)品孔出現(xiàn)明顯梯度顯色；快速加入50μL終止液，輕輕振蕩混勻，終止顯色反應(yīng)（終止液加入后，藍(lán)色會(huì)立即轉(zhuǎn)為黃色，確保終止反應(yīng)徹di）；五是結(jié)果檢測(cè)，將酶標(biāo)板放入酶標(biāo)儀，設(shè)置檢測(cè)波長(zhǎng)為450nm（參考波長(zhǎng)630nm），測(cè)定每孔的吸光度（OD值），空白對(duì)照孔OD值需扣除，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，代入樣本OD值計(jì)算樣本中PDI前體的具體含量，同時(shí)可結(jié)合PDI前體正常參考范圍（不同樣本類(lèi)型參考范圍略有差異，細(xì)胞裂解液樣本通常為0.1-5ng/mL）輔助分析結(jié)果。

適用實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景

該試劑盒專(zhuān)為PDI前體相關(guān)檢測(cè)及研究設(shè)計(jì)，貼合其精準(zhǔn)定量檢測(cè)特性及PDI前體的蛋白質(zhì)折疊調(diào)控功能，適配科研、藥物研發(fā)、教學(xué)等多種場(chǎng)景，核心應(yīng)用圍繞PDI前體定量檢測(cè)、疾病機(jī)制研究及蛋白調(diào)控研究展開(kāi)，具體包括：一是PDI前體定量檢測(cè)研究，用于人血清、血漿、細(xì)胞裂解液等各類(lèi)樣本中PDI前體的含量檢測(cè)，精準(zhǔn)分析不同樣本、不同疾病狀態(tài)下PDI前體的含量差異，助力PDI前體的加工成熟機(jī)制、蛋白質(zhì)折疊調(diào)控通路的基礎(chǔ)研究，探究其在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能穩(wěn)態(tài)中的核心作用；二是疾病相關(guān)研究，用于自身免疫性疾病、腫瘤（如肺癌、乳腺癌、肝癌）、神經(jīng)退行性疾病、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)疾病等PDI前體表達(dá)異常相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制研究，檢測(cè)疾病模型樣本與正常樣本、藥物干預(yù)前后樣本中PDI前體的含量差異，分析PDI前體異常與疾病嚴(yán)重程度、預(yù)后的關(guān)聯(lián)，為疾病診斷、治療方案優(yōu)化提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)；三是藥物研發(fā)與篩選，用于PDI前體相關(guān)靶向藥物、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激調(diào)節(jié)劑、抗腫瘤藥物、自身免疫病治療藥物等的篩選及療效評(píng)估，檢測(cè)藥物處理后樣本中PDI前體的含量變化，分析藥物對(duì)PDI前體表達(dá)、蛋白質(zhì)折疊調(diào)控功能的調(diào)控作用，為藥物研發(fā)提供可靠的檢測(cè)模型；四是基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)與教學(xué)應(yīng)用，可用于ELISA檢測(cè)技術(shù)的教學(xué)、抗原-抗體特異性結(jié)合實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證，以及蛋白質(zhì)折疊、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)可用于科研實(shí)驗(yàn)中PDI前體定量檢測(cè)的常規(guī)應(yīng)用，助力分子生物學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)與基礎(chǔ)研究；五是臨床科研樣本篩查，可用于臨床科研樣本中PDI前體的快速定量檢測(cè)，為疾病早期篩查、療效監(jiān)測(cè)、病情分型提供輔助檢測(cè)數(shù)據(jù)，適配臨床科研相關(guān)實(shí)驗(yàn)需求，需注意該試劑盒僅供科研使用，不能作為疾病早期診斷或確診的依據(jù)。

備注：（具體檢測(cè)操作步驟、樣本預(yù)處理方法、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及結(jié)果計(jì)算請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)）

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

儲(chǔ)存方面，該試劑盒未開(kāi)封時(shí)需置于2-8℃冷藏避光保存，有效期為6個(gè)月，嚴(yán)禁冷凍儲(chǔ)存，避免試劑結(jié)冰破壞抗體活性、酶的催化功能及PDI前體標(biāo)準(zhǔn)品穩(wěn)定性；開(kāi)封后，酶標(biāo)板需密封置于2-8℃冷藏，避免受潮、污染，剩余試劑需密封保存，盡快在1個(gè)月內(nèi)用完，避免試劑失效；標(biāo)準(zhǔn)品溶解后，可置于-20℃分裝凍存，保存時(shí)間不超過(guò)1個(gè)月，避免反復(fù)凍融，防止PDI前體降解、變性影響檢測(cè)結(jié)果，凍存時(shí)需加入蛋白酶抑制劑，用密封袋包裹，避免受到污染。注意事項(xiàng)包括：產(chǎn)品僅供科研使用，不用于臨床診斷及治療，不宜用于普通人群的疾病篩查；實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作，確保加樣量、孵育溫度、孵育時(shí)間精準(zhǔn)，避免操作不當(dāng)影響檢測(cè)結(jié)果；樣本預(yù)處理需規(guī)范，加入蛋白酶抑制劑防止PDI前體降解，細(xì)胞、組織樣本需充分裂解以釋放PDI前體，避免樣本溶血、污染，預(yù)處理后的樣本需及時(shí)檢測(cè)，不可長(zhǎng)時(shí)間放置，采集的樣本需低溫冰浴運(yùn)輸，避免PDI前體變性、降解；實(shí)驗(yàn)所用器材需無(wú)酶、無(wú)熱源、無(wú)污染，移液器吸頭需一次性使用，避免交叉污染；洗滌步驟需徹di，避免孔內(nèi)殘留液體，影響顯色反應(yīng)及檢測(cè)結(jié)果；顯色過(guò)程需避光，避免光照影響底物顯色效果，終止反應(yīng)后需在15分鐘內(nèi)完成酶標(biāo)儀檢測(cè)，防止顯色加深或褪色；試劑需在有效期內(nèi)使用，過(guò)期試劑嚴(yán)禁使用，廢棄試劑及實(shí)驗(yàn)廢液需按照生物安全規(guī)范妥善處理，易燃易爆、腐蝕性試劑需分區(qū)存放，確保實(shí)驗(yàn)安全；運(yùn)輸過(guò)程中采用冷藏運(yùn)輸，避免高溫、劇烈震蕩，確保試劑活性及PDI前體標(biāo)準(zhǔn)品穩(wěn)定性，運(yùn)輸后需及時(shí)轉(zhuǎn)入2-8℃冷藏環(huán)境，開(kāi)展運(yùn)輸后穩(wěn)定性檢測(cè)；此外，樣本中過(guò)高的蛋白酶濃度、強(qiáng)還原劑、重金屬離子可能導(dǎo)致PDI前體檢測(cè)結(jié)果異常，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)需避開(kāi)此類(lèi)干擾因素，必要時(shí)加入相應(yīng)抑制劑或進(jìn)行樣本純化處理。

訂購(gòu)信息

如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，可通過(guò)“聯(lián)系我們"頁(yè)面提交需求，我們將及時(shí)回復(fù)。

以上信息僅供參考，具體請(qǐng)已產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。